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Hoechst 33342/PI 雙染試劑盒（Hoechst 33342/PI Double Stain Kit）采用Hoechst 33342和碘化丙啶（PI）雙染的方法以區(qū)分凋亡細胞和壞死細胞的試劑盒。其檢測原理是：細胞核熒光染料Hoechst 33342可以穿透細胞膜，嵌入雙鏈DNA后釋放藍色熒光。對于正常細胞，其可少許進入細胞膜使其染上低藍色。而凋亡細胞由于細胞膜通透性增強，從而使得進入凋亡細胞內的Hoechst 33342明顯多于正常細胞，熒光強度比正常細胞要高。另外，細胞發(fā)生凋亡時染色質會固縮，從而使得染料能更有效和聚集的結合于DNA，并且凋亡細胞膜上的p-糖蛋白泵功能受損而不能有效的將Hoechst 33342排除到細胞外使其在細胞內的積累增加，這些特征都使得凋亡細胞經染色后熒光會比正常細胞明顯增強。但細胞核熒光染料PI不能穿透細胞膜完整的正常細胞或凋亡細胞，即活細胞對PI染料拒染而對于壞死細胞，其細胞膜的完整性在早期即已喪失，可被PI染色。

經上述兩種染料雙染后，使用流式細胞儀或熒光顯微鏡檢測時，正常細胞為弱紅色熒光＋弱藍色熒光，凋亡細胞為弱紅色熒光＋強藍色熒光，壞死細胞為強紅色熒光＋弱藍色熒光。

本試劑盒染色快速方便，可用一步法或者兩步法進行染色。使用流式細胞儀檢測時，無需稀釋等配制過程，也無需再準備其它任何溶液。本試劑盒足夠檢測100個樣品，每個樣品的細胞數量可達105-106個。

注意事項

1) Hoechst 33342、PI對人體有害，請注意適當防護；

2) Hoechst 33342、PI需避光，整個實驗過程盡量避光操作；

3) 熒光染料均存在淬滅情況，建議染色后需盡快檢測；

4) Hoechst 33342 與細胞孵育時間不宜過長，一般控制在20min以內。太長容易引起該染料的發(fā)射光譜由藍光向紅光遷移，導致紅色熒光和藍色熒光比例改變。

5) 如果用于組織樣品檢測，則必須把組織消化制備成單細胞懸浮液后才可以進行檢測。

6) 為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

儲存條件：-20℃，有效期12個月

Hoechst 33342/PI雙染試劑盒細胞生物學研究有以下幾個方面。

細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括。
①細胞核、染色體以及基因表達的研究。
②生物膜與細胞器的研究。
③細胞骨架體系的研究。
④細胞增殖及其調控。
⑤細胞分化及其調控。
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)。
⑦細胞的起源與進化。
⑧細胞工程。

原創(chuàng)作者：上海莼試生物技術有限公司

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