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阿爾瑪藍(lán)（Alamar Blue）是一種氧化還原指示劑，能根據(jù)代謝活性產(chǎn)生吸亮度變化和熒光信號(hào)。這是一種安全無(wú)毒的染料，可用于細(xì)胞活性和細(xì)胞增殖的定量分析以及細(xì)胞因子生物測(cè)定和體外細(xì)胞毒性研究，能有效測(cè)定動(dòng)物、真菌和細(xì)菌細(xì)胞的天然代謝活性。Alamar Blue在氧化狀態(tài)下呈現(xiàn)紫藍(lán)色無(wú)熒光性，而在還原狀態(tài)下，轉(zhuǎn)變?yōu)槌史奂t或紅色熒光的還原產(chǎn)物，反映所研究的細(xì)胞或微生物對(duì)氧分子的消耗，因而常被用作氧化還原指示劑，以顯示被觀察細(xì)胞和細(xì)菌的代謝活動(dòng)。這種測(cè)定是基于具有代謝活性的細(xì)胞將試劑轉(zhuǎn)換成熒光和比色指示劑的能力。在細(xì)胞增殖過(guò)程中，細(xì)胞內(nèi)NADPH/NADP、FADH/FAD、FMNH/FMN和NADH/NAD的比值升高，處于還原環(huán)境。攝入細(xì)胞內(nèi)的染料被這些代謝中間體及細(xì)胞色素類還原后釋放到細(xì)胞外并溶于培養(yǎng)基中，使培養(yǎng)基從無(wú)熒光的靛青藍(lán)變成有熒光的粉紅色。受損和無(wú)活性細(xì)胞具有較低的天然代謝活性，因此對(duì)應(yīng)的信號(hào)較低?？梢杂闷胀ǚ止夤舛扔?jì)或熒光光度計(jì)檢測(cè)，其激發(fā)光波長(zhǎng)在530-560 nm之間，發(fā)射光波長(zhǎng)為590 nm。吸光度和熒光強(qiáng)度與活性細(xì)胞數(shù)成正比。

本品可廣泛地用于細(xì)胞增殖代謝，藥物的細(xì)胞毒作用的體外測(cè)定以及病原微生物的的快速檢測(cè)與鑒定。與臺(tái)盼蘭、TTC、MTT、MTS等分析法相比，Alamar Blue具有更多的優(yōu)勢(shì)。Alamar Blue采用單一試劑，可以連續(xù)、快速地檢測(cè)細(xì)胞的增生狀態(tài)。由于Alamar Blue對(duì)細(xì)胞無(wú)毒、無(wú)害，不影響細(xì)胞的抗體合成與分泌等活性，因此可以對(duì)同一批細(xì)胞的增生狀態(tài)進(jìn)行連續(xù)觀察和進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)觀察，因此有操作簡(jiǎn)便和幾乎不干擾細(xì)胞正常代謝的特點(diǎn)。

注意事項(xiàng)

1）需客戶自行準(zhǔn)備100%還原型Alamar Blue試劑。為得到還原型Alamar Blue，需配制Alamar Blue與細(xì)胞培養(yǎng)基的混合溶液，Alamar Blue與細(xì)胞培養(yǎng)基的比值為1:10，高壓滅菌15min。（不能對(duì)濃縮的Alamar Blue高壓滅菌，也不能用PBS配制溶液，因?yàn)?00%還原型Alamar Blue在PBS中不穩(wěn)定。）

2）為得到最好的結(jié)果，建議實(shí)驗(yàn)前先摸索孵育時(shí)間和接種細(xì)胞數(shù)量。

3）合適密度的細(xì)胞可以增加檢測(cè)靈敏度。對(duì)于96 孔板，我們建議每孔接種100 微升細(xì)胞，細(xì)胞濃度范圍為：貼壁細(xì)胞在100-10,000/孔，懸浮細(xì)胞在2,000-50,000/孔，并以培養(yǎng)基為空白對(duì)照。對(duì)于384 孔板，細(xì)胞濃度和接種量均減半。

4）整個(gè)過(guò)程均應(yīng)為無(wú)菌操作，因?yàn)槲⑸镂廴疚锿瑯涌梢赃€原檢測(cè)試劑而影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

5）注意接種細(xì)胞濃度和加入檢測(cè)試劑后孵育時(shí)間。細(xì)胞濃度過(guò)高或孵育時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，會(huì)導(dǎo)致繼發(fā)性還原反應(yīng)，產(chǎn)生無(wú)色和熒光消失。

6）孵育時(shí)，須避光。

7）本產(chǎn)品可以使用熒光或分光光度計(jì)檢測(cè)，但熒光的靈敏度高，實(shí)驗(yàn)誤差小，推薦使用熒光檢測(cè)。

儲(chǔ)存條件：4℃，有效期一年

阿爾瑪藍(lán)細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面。

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括。
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究。
②生物膜與細(xì)胞器的研究。
③細(xì)胞骨架體系的研究。
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控。
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控。
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)。
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化。
⑧細(xì)胞工程。

原創(chuàng)作者：上海莼試生物技術(shù)有限公司

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