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TUNEL 細(xì)胞凋亡檢測試劑盒（FITC 標(biāo)記/POD 法）是用來檢測細(xì)胞在凋亡過程中細(xì)胞核DNA 的斷裂情況，其原理是生物素（biotin）標(biāo)記的dUTP 在脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶（TdT Enzyme）的作用下,可以連接到凋亡細(xì)胞中斷裂DNA 的3’-OH 末端，再以streptavidin-FITC 與生物素結(jié)合，使結(jié)果可用熒光顯微鏡檢測；熒光素亦可被偶聯(lián)過氧化物酶Peroxidase（POD）的抗熒光素抗體(POD-conjugated Anti-FITC)標(biāo)記,在POD 底物二氨基聯(lián)苯胺（DAB）的存在下，產(chǎn)生很強(qiáng)的顏色反應(yīng)（呈棕色），特異準(zhǔn)確地定位正在凋亡的細(xì)胞，因而在普通光學(xué)顯微鏡下即可觀察和計數(shù)凋亡細(xì)胞。由于正常的或正在增殖的細(xì)胞幾乎沒有DNA 的斷裂，因而沒有3’-OH 形成，很少能夠被標(biāo)記或染色。

注意事項

1. 各個樣本請用免疫組化筆做好標(biāo)記，另外加2 張樣本切片分別用于陽性片和陰性片制備并做好標(biāo)記。

2. 在每步反應(yīng)或浸洗的間隙時，配制下一步即用的工作液。

3. 反應(yīng)液最好根椐計算好的樣本數(shù)量集中配制，再分別滴加于各樣本上，避免因每個樣本單獨(dú)配制而產(chǎn)生的試劑損耗，TdT 酶反應(yīng)液如需短暫保存時，請置于冰上。

4. 配制好的DAB 工作液應(yīng)為淺棕色，如顏色過深，請勿使用。

5. 操作請戴手套，防止試劑沾染皮膚，如有沾染請立即用大量清水沖洗。

TUNEL細(xì)胞凋亡檢測試劑盒(FITC標(biāo)記POD法,通用)細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面。

細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括。
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究。
②生物膜與細(xì)胞器的研究。
③細(xì)胞骨架體系的研究。
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控。
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控。
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)。
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化。
⑧細(xì)胞工程。

原創(chuàng)作者：上海莼試生物技術(shù)有限公司

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