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本試劑盒可應(yīng)用于細(xì)胞、組織或純化的線粒體膜電位檢測。大量的研究表明線粒體與細(xì)胞凋亡密切相關(guān)，其中線粒體跨膜電位（△）的破壞，被認(rèn)為是細(xì)胞凋亡級(jí)聯(lián)反應(yīng)過程中最早發(fā)生的事件之一，它發(fā)生在細(xì)胞核凋亡特征（染色質(zhì)濃縮、DNA斷裂）出現(xiàn)之前，一旦線粒體跨膜電位崩潰，則細(xì)胞凋亡不可逆轉(zhuǎn)。

本試劑盒采用JC-10 (Enhanced JC-1)一種陽離子脂質(zhì)熒光染料作為檢測線粒體跨膜電位指示劑。JC-100 可以選擇性地進(jìn)入線粒體，且由于膜電位的增加，其顏色會(huì)發(fā)生從綠色到橙色的可逆性改變。這種特性是由于JC-100 聚合物的可逆結(jié)構(gòu)，在膜極化條件下，它的發(fā)射光由520nm(JC-100 單體發(fā)射光)轉(zhuǎn)移到570nm (J-聚合體發(fā)射光)。當(dāng)在490nm 處激發(fā)時(shí)，JC-100 發(fā)生從綠色到橙綠色的可逆改變。這兩種顏色都可以被流式細(xì)胞儀上裝好的一般濾光器檢測到，因此綠色發(fā)射光可以通過熒光通道1（FL1）進(jìn)行分析，橙綠色發(fā)射光可以通過熒光通道2（FL2）進(jìn)行分析。它除了有潛力用于流式細(xì)胞術(shù)，也可以用于熒光成像分析。

注意事項(xiàng)

1. 微量試劑取用前請(qǐng)離心集液。

2. JC-10 避光保存及使用。

3. 細(xì)胞培養(yǎng)至匯合度80-90%，收集細(xì)胞量在1×106/Test。

4. 對(duì)PH 變化過于敏感的細(xì)胞建議用胎牛血清取代Buffer 孵育染色及洗滌，或延長觀測時(shí)間。

5. 流式細(xì)胞儀檢測線粒體膜電位變化受到多種因素的影響，因誘導(dǎo)劑、細(xì)胞株類型，作用時(shí)間的不同而熒光強(qiáng)度比例都有不同，因此沒有通用標(biāo)準(zhǔn)的補(bǔ)償設(shè)門指南，因此每個(gè)試驗(yàn)需設(shè)陰性及陽性對(duì)照組進(jìn)行熒光補(bǔ)償及設(shè)門。

6. 組織需先制備單細(xì)胞懸液或提取純化線粒體后方可進(jìn)行檢測，可選用我司細(xì)胞懸液制備試劑盒或線粒體提取試劑盒。

細(xì)胞凋亡線粒體膜電位檢測試劑盒(JC-10)細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面。

細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括。
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究。
②生物膜與細(xì)胞器的研究。
③細(xì)胞骨架體系的研究。
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控。
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控。
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)。
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化。
⑧細(xì)胞工程。

原創(chuàng)作者：上海莼試生物技術(shù)有限公司

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