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JC-1是一種廣泛用于檢測線粒體膜電位(mitochondrial membrane potential)△Ψm的理想熒光探針。可以檢測細胞、組織或純化的線粒體膜電位。在線粒體膜電位較高時，JC-1聚集在線粒體的基質(matrix)中，形成聚合物(J-aggregates)，可以產(chǎn)生紅色熒光；在線粒體膜電位較低時，JC-1不能聚集在線粒體的基質中，此時JC-1為單體(monomer)，可以產(chǎn)生綠色熒光。這樣就可以非常方便地通過熒光顏色的轉變來檢測線粒體膜電位的變化。常用紅綠熒光的相對比例來衡量線粒體去極化的比例。

線粒體膜電位的下降是細胞凋亡早期的一個標志性事件。通過JC-1從紅色熒光到綠色熒光的轉變可以很容易地檢測到細胞膜電位的下降，同時也可以用JC-1從紅色熒光到綠色熒光的轉變作為細胞凋亡早期的一個檢測指標。

JC-1單體的最大激發(fā)波長為514nm，最大發(fā)射波長為529nm；JC-1聚合物(J-aggregates)的最大激發(fā)波長為585nm，最大發(fā)射波長為590nm。實際觀察時，使用常規(guī)的觀察紅色熒光和綠色熒光的設置即可。

本試劑盒提供了CCCP作為誘導線粒體膜電位下降的陽性對照。對于六孔板中的樣品，本試劑盒共可以檢測100個樣品；對于12孔中的樣品，本試劑盒共可以檢測200個樣品。

試劑盒組分：

JC-1(200X)——————100μl/管，共5管

超純水————————90ml

JC-1染色緩沖液(5X)——80ml

CCCP(10mM)——————20μl

注意事項：

1. JC-1(200X)在4℃、冰浴等較低溫度情況下會凝固而粘在離心管管底、管壁或管蓋內，可以20-25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。

2. 必須先把JC-1(200X)用試劑盒提供的超純水充分溶解混勻后，才可以加入JC-1染色緩沖液(5X)。不可先配制JC-1染色緩沖液(1X)再加入JC-1(200X)，這樣JC-1會很難充分溶解，會嚴重影響后續(xù)的檢測。

3. 裝載完JC-1后用JC-1染色緩沖液(1X)洗滌時，使JC-1染色緩沖液(1X)保持4℃左右，此時的洗滌效果較好。

4. JC-1探針裝載完并洗滌后盡量在30分鐘內完成后續(xù)檢測。在檢測前需冰浴保存。

5. 請勿把JC-1染色緩沖液(5X)全部配制成JC-1染色緩沖液(1X)，本試劑盒使用過程中需直接使用JC-1染色緩沖液(5X)。

6. 如果發(fā)現(xiàn)JC-1染色緩沖液(5X)中有沉淀，必須全部溶解后才能使用，為促進溶解可以在37℃加熱。

7. CCCP為線粒體電子傳遞鏈抑制劑，有毒，請注意小心防護。

儲存條件：-20℃。

線粒體膜電位檢測試劑盒細胞生物學研究有以下幾個方面。

細胞生物學的研究內容十分廣泛,主要包括。
①細胞核、染色體以及基因表達的研究。
②生物膜與細胞器的研究。
③細胞骨架體系的研究。
④細胞增殖及其調控。
⑤細胞分化及其調控。
⑥細胞的衰老與編程性死亡(凋亡)。
⑦細胞的起源與進化。
⑧細胞工程。

原創(chuàng)作者：上海莼試生物技術有限公司

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