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本試劑盒是采用分光光度法檢測細(xì)胞或組織裂解液中caspase 9酶活性或純化的caspase 9酶活性的試劑盒。
Caspase是一個在細(xì)胞凋亡過程中起重要作用的蛋白酶家族。Caspase 9也稱ICE-LAP6或Mch6，有時被寫作caspase-9或caspase 9，是細(xì)胞凋亡信號轉(zhuǎn)導(dǎo)過程中比較上游的一個caspase。線粒體釋放細(xì)胞色素c以后，caspase 9可以和細(xì)胞色素c以及Apaf1形成復(fù)合物，同時被激活。激活的caspase 9可以激活細(xì)胞凋亡的最關(guān)鍵酶caspase 3，從而促進(jìn)后續(xù)的細(xì)胞凋亡信號。Caspase 9的激活可以通過磷酸化進(jìn)行調(diào)控。
本Caspase 9活性檢測試劑盒是基于caspase 9可以催化底物Ac-LEHD-pNA(acetyl-Leu-Glu-His-Asp p-nitroanilide)產(chǎn)生黃色的pNA(p-nitroaniline)，從而可以通過測定吸光度來檢測caspase 9的活性。pNA在405nm附近有強(qiáng)吸收。
試劑盒中提供了caspase 9催化產(chǎn)生的黃色產(chǎn)物pNA，可以作為定量caspase 9酶活性的標(biāo)準(zhǔn)品。
試劑盒組分：
裂解液——————8ml
檢測緩沖液——————8ml
Ac-LEHD-pNA(2mM)———200μl
pNA(10mM)——————200μl
注意事項(xiàng)：
1. 須自備可以測定A405或A400的酶標(biāo)儀或容量不超過100μl的分光光度檢測杯及相應(yīng)分光光度計(jì)。優(yōu)先考慮測定A405，如有困難可以測定A400。
2. Ac-LEHD-pNA需盡量避免反復(fù)凍融，請注意適當(dāng)分裝。
3. 測定蛋白濃度需Bradford蛋白濃度測定試劑盒(YT034)，可向百奧萊博訂購。建議樣品用水稀釋1倍后再用Bradford法測定蛋白濃度，以降低DTT對蛋白濃度測定的干擾。
4. pNA(中文名為4-硝基苯胺)有毒，請注意小心防護(hù)。pNA(10mM)在4℃、冰浴等較低溫度情況下會凝固而粘在離心管管底、管壁或管蓋內(nèi)，可以20-25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。
5. 本試劑盒的裂解液可以和百奧萊博的其它c(diǎn)aspase活性檢測試劑盒的裂解液通用，即本試劑盒裂解液制備的蛋白樣品可以用于百奧萊博其它c(diǎn)aspase活性檢測試劑盒的檢測。
儲存條件：-20℃

Caspase 9 活性檢測試劑盒細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面。

細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括。
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究。
②生物膜與細(xì)胞器的研究。
③細(xì)胞骨架體系的研究。
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控。
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控。
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)。
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化。
⑧細(xì)胞工程。

原創(chuàng)作者：上海莼試生物技術(shù)有限公司

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