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公司新聞

細胞毒性技術保護點

閱讀:674     發(fā)布時間:2020/3/24 14:22:13

        細胞毒性是指由化學物質引起的細胞殺傷事件,不依賴于凋亡或壞死的細胞死亡機理;瘜W物質的細胞毒性測試,對人類健康風險評估、藥物篩選、食品添加劑的安全測試,以及農(nóng)藥的毒性檢定都具有重要的意義。目前,有很多技術可以實現(xiàn)化合物的細胞毒性測定,如:MTT、XTT法(利用線粒體內部酶的活性,可以將特定的四唑鹽類進行轉化,然后通過酶標儀進行檢測),LDH方法(通過檢測細胞培養(yǎng)上清中LDH的酶活性,來檢測細胞毒性)。盡管這些方法可以實現(xiàn)細胞毒性測定,但存在諸多弊端,(I)大部分方法的測定程序繁瑣,無法實現(xiàn)高通量篩選(High Throughput Screening,HTS); (2)中性紅染料染...


技術保護點

一種高通量細胞毒性評估方法,所用的系統(tǒng)包括用于監(jiān)測細胞生長和控制其生長環(huán)境參數(shù)的PC機或筆記本電腦、用于維持細胞生長環(huán)境的細胞培養(yǎng)箱、高通量的384x微電極板、靶細胞、待測化合物和阻抗信號傳遞電纜,PC機或筆記本電腦安裝有ACEA公司開發(fā)的實時細胞監(jiān)控軟件,實時細胞監(jiān)控軟件通過電纜獲取阻抗信號變化,并將這種阻抗信號變化轉化成細胞指數(shù)顯示在系統(tǒng)中,384x微電極板置于細胞培養(yǎng)箱中,靶細胞接種在384x微電極板中,其特征在于,該方法首先將靶細胞暴露在具有不同濃度的待測化合物中,并利用實時細胞監(jiān)控軟件記錄整個靶細胞暴露過程的響應曲線;然后根據(jù)響應曲線所體現(xiàn)的細胞數(shù)量的變化,計算細胞毒性指標,該指標為靶細胞在整個指數(shù)增長期的數(shù)量變化,即靶細胞響應面積,且采用多濃度測試方法,得到基于靶細胞響應面積的“濃度‑響應曲線”;最后,在“濃度‑響應曲線”所反映的待測化合物細胞毒性隨濃度變化規(guī)律的基礎上,計算得到新的細胞毒性指標。 
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