細(xì)胞 (英文名:cell)并沒有統(tǒng)一的定義,比較普遍的提法是:細(xì)胞是生物體基本的結(jié)構(gòu)和功能單位。已知除病毒之外的所有生物均由細(xì)胞所組成,但病毒生命活動(dòng)也必須在細(xì)胞中才能體現(xiàn)。
一般來說,細(xì)菌等絕大部分微生物以及原生動(dòng)物由一個(gè)細(xì)胞組成,即單細(xì)胞生物,高等植物與高等動(dòng)物則是多細(xì)胞生物。細(xì)胞可分為原核細(xì)胞、真核細(xì)胞兩類,但也有人提出應(yīng)分為三類,即把原屬于原核細(xì)胞的古核細(xì)胞獨(dú)立出來作為與之并列的一類。研究細(xì)胞的學(xué)科稱為細(xì)胞生物學(xué)。
細(xì)胞體形極微,在顯微鏡下始能窺見,形狀多種多樣。主要由
細(xì)胞核與細(xì)胞質(zhì)構(gòu)成,表面有細(xì)胞膜。高等植物細(xì)胞膜外有細(xì)胞壁,細(xì)胞質(zhì)中常有質(zhì)體,體內(nèi)有葉綠體和液泡,還有線粒體。動(dòng)物細(xì)胞無細(xì)胞壁,細(xì)胞質(zhì)中常有中心體,而高等植物細(xì)胞中則無。細(xì)胞有運(yùn)動(dòng)、營養(yǎng)和繁殖等機(jī)能。
細(xì)胞凍存1.預(yù)先配制凍存液:10%DMSO+90%胎牛血清,4℃冰箱保存預(yù)冷;
2.用胰酶對(duì)細(xì)胞進(jìn)行消化:倒去培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基或用槍小心吸去培養(yǎng)板中的培養(yǎng)基,PBS沖洗兩次,用胰酶消化細(xì)胞(盡可能溫和);
3.再次用完全培養(yǎng)液懸浮細(xì)胞,將預(yù)冷的凍存液加入消化完全的細(xì)胞中,用滴管輕輕吹打混勻.
4.在每支凍存管中加入1ml細(xì)胞液,密封后標(biāo)記凍存
細(xì)胞名稱和凍存日期.
5.凍存步驟的細(xì)致直接關(guān)系到細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)的活力,如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜,放入液氮罐)最好;或者可以在4℃,2h;然后轉(zhuǎn)到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐.這是我實(shí)驗(yàn)中用的protocol,