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人抗腮腺管抗體（anti-parotid duct Ab）elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)條件的選擇

閱讀：422     發(fā)布時(shí)間：2022/2/23 14:37:58

 在人抗腮腺管抗體(anti-parotid duct Ab)elisa試劑盒中，進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇是很重要的，其中包括：​
 
1)固相載體的選擇：許多物質(zhì)可作為固相載體，如聚氯yi烯、聚苯y(tǒng)i烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯y(tǒng)i烯凹孔板。不管何種載體，在使用前均可進(jìn)行篩選：用等量抗原包被，在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng)，觀察其顯色反應(yīng)是否均一性，據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
 
 
(2)包被抗體(或抗原)的選擇：將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時(shí)，要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0～9.6之間。吸附溫度，時(shí)間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18～24小時(shí)。蛋白質(zhì)包被的zui適濃度需進(jìn)行滴定：即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進(jìn)行包被后，在其它試驗(yàn)條件相同時(shí)，觀察陽性標(biāo)本的OD值。選擇OD值zui大而蛋白量zui少的濃度。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1～10μg/ml。
 
(3)酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇：首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價(jià)的滴定(見酶標(biāo)記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。
 
(4) 酶的底物及供氫體的選擇：對供氫體的選擇要求是價(jià)廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng)，而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用，應(yīng)注意防護(hù)。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體，如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時(shí)間后，應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時(shí)間，以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制，尤其是雙yang水在臨用前加入。
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磷酸化Ack1抗體
磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α1抗體
磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶β1抗體
磷酸化間變型淋巴瘤激酶抗體
磷酸化毛細(xì)血管擴(kuò)張性共濟(jì)失調(diào)癥突變蛋白抗體
磷酸化三磷酸腺檸檬酸裂解酶抗體
磷酸化ATR抗體
細(xì)胞核重定位及紡錘體檢查點(diǎn)蛋白AMN1抗體
天門冬酰胺連接糖基化11抗體
細(xì)胞衰老相關(guān)蛋白ASF1A抗體
氨基糖苷類磷酸結(jié)構(gòu)域蛋白抗體
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微絲相關(guān)蛋白1抗體
腺苷A1A受體抗體
芳基硫酸酯酶B抗體
γ氨基丁酸轉(zhuǎn)氨酶抗體
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腫瘤壞死因子α轉(zhuǎn)換酶
 
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