操作因素對ELISA結果的影響

閱讀：888     發(fā)布時間：2019/3/14 15:04:03

     臨床測定技術的發(fā)展主要在于方法學的發(fā)展，而方法學的發(fā)展依托于試劑生產技術不斷進步更新和型標記物的應用。

        目前，分子生物學正在并zui終肯定會讓我們對整個生命科學有一個全面而徹底的認識，其對免疫測定技術發(fā)展的影響也是直接而又有效的，它使我們對以前一些難以檢測的生物活性物質的測定變得輕而易舉，并且大大提高了檢測的靈敏度和特異性。ELISA質量保證是一個復雜的過程，許多重要的環(huán)節(jié)都影響到檢測的質量：
 

一、操作因素對ELISA結果的影響
ELISA操作步驟復雜，操作不當將引起較大的誤差。以下敘述各個步驟中的影響因素。
1.加樣
2.溫育
3.洗滌
4.顯色
5.比色
 

二、灰區(qū)的設置
  通常情況下，ELISA定性實驗以“陽性”和“陰性”來報告結果，兩者間有一條分界線被稱為“陽性判斷值”（cut-off value，CO值），這是定性免疫測定結果報告的依據。
三、標本復查
 ELISA手工檢測過程復雜，影響因素較多，即使室內質控在控，也可能因孔間差異而造成結果的差異，因此加大復查力度是保證結果準確性的可靠方法，比如對HBsAg、HBeAg、HCV-Ab、HIV-Ab、TP-Ab等項目的可疑、弱陽性標本及少見模式的檢測結果進行復查。
四、結果判斷和報告
常用下列幾種方法表示結果：
1.定性測定
2.半定量測定 結果一般以滴度表示
3.定量測定 即用已知量的標準品作一系列稀釋后進行ELISA測定，繪制標準曲線，結果以量或單位表示。在ELISA定量檢測中每一塊反應板都必須繪制相應的標準曲線
4.結果報告