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PATU8988/FU人胰腺癌氟尿嘧啶耐藥株操作步驟

閱讀：562     發(fā)布時間：2020/6/30 16:08:52

 PATU8988/FU人胰腺癌氟尿嘧啶耐藥株貼壁細(xì)胞
客戶接收到細(xì)胞,用75원的酒精消毒(建議西配制75%酉精的水是滅菌過的
基顏色,顯微濆觀察細(xì)胞生長情兄,并對細(xì)胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細(xì)胞100顯微鏡觀察細(xì)胞,當(dāng)細(xì)胞匯至80左右(可以傳代的情兄下),細(xì)胞應(yīng)該在37度培養(yǎng)箱予預(yù)溫1-2ム后再做處理。 PATU8988/FU人胰腺癌氟尿嘧啶耐藥株如未達到細(xì)胞傳代密度,培養(yǎng)瓶應(yīng)預(yù)留一部分培養(yǎng)基繼續(xù)培嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。PATB988/U人胰腺癌氯際定耐藥株將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無茵容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞)/次輕輕洗細(xì)胞表面,加入適里的0.05胰-EDTA消化細(xì)胞,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫培養(yǎng)
 PATU8988/FU人胰腺癌氟尿嘧啶耐藥株操作步驟：
請收到細(xì)胞后，在倒置鏡下(建議在4X物鏡)觀察整個細(xì)胞生長情況。
（一）如果細(xì)胞未長滿，用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶，吸出培養(yǎng)液，換 10ml新鮮培養(yǎng)液后繼續(xù)培養(yǎng)。
（二） (二)如果細(xì)胞已長滿，即可進行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下：
1.棄去培養(yǎng)液，用PBS（不含鈣,鎂離子）洗1-2次。
2.加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，倒放于37℃培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱， PATU8988/FU人胰腺癌氟尿嘧啶耐藥株之后翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶10-30秒后，在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量完全培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加完全培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出一半，分到新的培養(yǎng)瓶中。
如果沒有特別說明，收到細(xì)胞后的*次傳代一般是一傳二。

原創(chuàng)作者：上海莼試生物技術(shù)有限公司

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