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技術(shù)服務(wù)

伏馬毒素檢測(cè)試劑盒原理及用途

閱讀：566     發(fā)布時(shí)間：2020/2/13 16:47:22

伏馬毒素檢測(cè)試劑盒原理及用途
伏馬毒素(Fumonisins)是由串珠鐮刀菌產(chǎn)生的真菌毒素，目前已知有28種衍生物，研究表明伏馬毒素可引發(fā)馬的白腦軟化癥，豬的肺水腫綜合癥，此外，還可誘發(fā)人類的食道癌和肝癌、胃癌等疾病，對(duì)畜牧業(yè)和人類的健康構(gòu)成危害。
伏馬毒素檢測(cè)試劑盒由預(yù)包被偶聯(lián)抗原的酶標(biāo)板、辣根酶標(biāo)記物、抗體、標(biāo)準(zhǔn)品及其他配套試劑組成。檢測(cè)時(shí)，加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品溶液，樣本中的伏馬毒素和酶標(biāo)板上預(yù)包被偶聯(lián)抗原競(jìng)爭(zhēng)抗伏馬毒素抗體，加入酶標(biāo)記物后，用TMB底物顯色，樣本吸光度值與其所含伏馬毒素含量成負(fù)相關(guān)，與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較乘以樣本稀釋倍數(shù)即可得出樣本中伏馬毒素的殘留量。
聯(lián)免疫試驗(yàn)步驟
 
    將所需試劑從4℃冷藏環(huán)境中取出，置于室溫平衡30min以上, 洗滌液冷藏時(shí)可能會(huì)有結(jié)晶需恢復(fù)到室溫以充分溶解，每種液體試劑使用前均須搖勻。取出需要數(shù)量的微孔板及框架，將不用的微孔板放入自封袋，保存于2-8℃。
 
實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前，用去離子水將20×濃縮洗滌液按20倍稀釋成工作洗滌液。
 
1 編    號(hào)：將樣本和標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào)，每個(gè)樣本和標(biāo)準(zhǔn)品做2孔平行，并記錄標(biāo)準(zhǔn)孔和樣本孔所在的位置。
 
2 加樣反應(yīng)：加標(biāo)準(zhǔn)品或樣本50μl/孔到各自的微孔中，然后加酶標(biāo)記物50μl/孔，再加入50μl/孔的抗體工作液，用蓋板膜封板，輕輕振蕩5秒混勻，25℃反應(yīng)30分鐘。
 
3 洗    滌：小心揭開(kāi)蓋板膜，將孔內(nèi)液體甩干，用工作洗滌液250μl/孔充分洗滌5次，每次間隔30秒，用吸水紙拍干（拍干后未被清除的氣泡可用干凈的槍頭刺破）。
 
4 顯    色：每孔加入底物液A 50μl，再加底物液B 50μl，輕輕振蕩5秒混勻，25℃避光顯色15分鐘。
 
5 終    止：每孔加入終止液50μl，輕輕振蕩混勻，終止反應(yīng)。
 
6 測(cè)吸光值：用酶標(biāo)儀于450nm處測(cè)定每孔吸光度值（建議用雙波長(zhǎng)450/630nm）。測(cè)定應(yīng)在終止反應(yīng)后10分鐘內(nèi)完成。

原創(chuàng)作者：上海莼試生物技術(shù)有限公司

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