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技術(shù)服務(wù)

末端同位素標(biāo)記試劑盒產(chǎn)品特點(diǎn)：

1. 使用本試劑盒之前，不需要對(duì) 5′末端的磷酸基團(tuán)進(jìn)行去磷酸化處理，因?yàn)槭褂玫膋inase 能使5′末端的磷酸與[γ-32P]ATP的γ-磷酸進(jìn)行交換。

2. 合成的單鏈或雙寡核苷酸的5′末端游離的OH基團(tuán)都能通過Kinase反應(yīng)被標(biāo)記(或者只是簡(jiǎn)單的磷酸化)。

3. 提供的兩種反應(yīng)液使交換反應(yīng)和磷酸化反應(yīng)都能高效進(jìn)行，均能得到大于106 cpm/pmol(5′-end)的比活性。

注意事項(xiàng)：

1.緩沖液可在室溫融解。融解后立即置于冰中，使用前充分混勻。

2. 5×交換反應(yīng)緩沖液于-20℃凍結(jié)保存時(shí)會(huì)有白色渾濁出現(xiàn)，但不影響反應(yīng)效果。

3.酶切得到的DNA片段需經(jīng)乙醇沉淀等方法純化。

4. 當(dāng)用于交換反應(yīng)的DNA在5 pmoles以上(約1,000bp以上)時(shí)，標(biāo)記效率有時(shí)會(huì)低于106 cpm/pmol。

5. 如果交換反應(yīng)所用 DNA低于500bp時(shí)，標(biāo)記效率有時(shí)會(huì)有所降低。

6. 若不進(jìn)行放射線標(biāo)記，僅使用本試劑盒做5′末端磷酸化反應(yīng)時(shí)，反應(yīng)體系中的［γ-32P］ATP可用5μl的10mM ATP 代替。

7. 磷酸化反應(yīng)時(shí)的［γ-32P］ATP可用［γ-35S］ATP 替代。

原創(chuàng)作者：上海莼試生物技術(shù)有限公司