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在線咨詢小鼠冠狀動脈組織提取物實驗操作步驟
閱讀:123 發(fā)布時間:2024/9/4 10:27:09
小鼠冠狀動脈組織提取物實驗操作步驟解決方案在完成小鼠冠狀動脈組織提取物的初步制備后,接下來的關(guān)鍵步驟在于精細處理與保存,以確保樣本的活性與完整性,為后續(xù)實驗提供可靠的基礎(chǔ)。
首先,對提取的組織進行細致清洗,以去除殘留的血液和雜質(zhì)。使用無菌生理鹽水或特定緩沖液輕輕沖洗數(shù)次,注意動作輕柔,避免破壞血管壁的完整性。隨后,將清洗后的組織迅速轉(zhuǎn)移至含有適量酶解液(如胰蛋白酶或膠原酶)的離心管中,根據(jù)組織量和酶活性調(diào)整酶解液的濃度與孵育時間,以有效解離細胞外基質(zhì),釋放單個細胞或細胞團塊。
酶解過程中,需置于搖床上以適宜轉(zhuǎn)速溫和振蕩,促進酶解液均勻滲透并加速反應。酶解結(jié)束后,加入含有胎牛血清的培養(yǎng)基終止酶解反應,并通過離心去除酶解液和未消化的組織碎片。離心后,輕輕吸棄上清,保留細胞沉淀,并可根據(jù)實驗需求進行細胞計數(shù)、純度鑒定或進一步的功能性實驗。
對于需要長期保存的樣本,可考慮將處理好的細胞或組織提取物進行冷凍保存。在冷凍前,可加入適量的細胞凍存液(通常包含DMSO、FBS和基礎(chǔ)培養(yǎng)基),以減緩冷凍過程中冰晶的形成,保護細胞免受損傷。隨后,將樣本分裝至無菌凍存管中,標記清楚后置于程序降溫盒內(nèi),最終轉(zhuǎn)移至-80°C冰箱或液氮罐中長期保存,以備后續(xù)實驗使用。
通過這一系列精細而嚴謹?shù)牟僮鞑襟E,我們不僅能有效提取并保存小鼠冠狀動脈組織的活性成分,還能為后續(xù)的研究工作奠定堅實的基礎(chǔ),推動心血管疾病相關(guān)研究的深入發(fā)展。
原創(chuàng)作者:上海莼試生物技術(shù)有限公司
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