近年來，ELISA試劑盒以靈敏度較高、特異性較好的特點得到了廣泛的應(yīng)用。ELISA可用于測定抗原，也可以用于測定抗體。根據(jù)試劑的來源和標(biāo)本的情況以及檢測的具體條件，可以分為雙抗夾心法、間接法、競爭法等常見幾種類型。
那么，這幾種常見類型分別適用于哪些實驗？這些類型的優(yōu)缺點又是什么呢？今天小編就和大家一起來了解下雙抗夾心法、間接法、競爭法。
雙抗體夾心法測抗原：雙抗體夾心法是檢測抗原zui常用的方法，適用于測定二價或二價以上的大分子抗原，但不適用于測定半抗原及小分子單價抗原，因其不能形成兩位點夾心。
雙抗原夾心法測抗體：反應(yīng)模式與雙抗體夾心法類似。用特異性抗原進(jìn)行包被和制備酶結(jié)合物，以檢測相應(yīng)的抗體。與間接法測抗體的不同之處為以酶標(biāo)抗原代替酶標(biāo)抗抗體。此法中受檢標(biāo)本不需稀釋，可直接用于測定，因此其敏感度相對高于間接法。乙肝標(biāo)志物中抗HBs的檢測常采用本法。本法關(guān)鍵在于酶標(biāo)抗原的制備，應(yīng)根據(jù)抗原結(jié)構(gòu)的不同，尋找合適的標(biāo)記方法。
間接法：是檢測抗體zui常用的方法，本法主要用于對病原體抗體的檢測而進(jìn)行傳染病的診斷。作為檢測抗體領(lǐng)域中的璀璨明珠，不僅是醫(yī)學(xué)診斷工具箱中不可或缺的一大利器，更是現(xiàn)代傳染病防控體系中的智慧結(jié)晶。此法巧妙地利用抗原與抗體之間猶如鎖鑰相合的特異性結(jié)合原理，構(gòu)筑起一道精準(zhǔn)識別病原體抗體的堅實屏障。在紛繁復(fù)雜的生物分子海洋中，間接法如同一位敏銳的偵探，悄無聲息地搜尋著那些潛藏在體液中的微量抗體線索，為傳染病的早期診斷與防控鋪設(shè)了堅實的基石。
具體而言，間接法通過引入一種已知且純化的病原體抗原作為“誘餌”，巧妙地設(shè)置了一場“分子級別的釣魚游戲”。當(dāng)待測樣本中的抗體“魚兒”游弋至此，它們會被抗原“誘餌”緊緊吸附，形成穩(wěn)定的抗原-抗體復(fù)合物。隨后，借助一系列精心設(shè)計的檢測步驟，如熒光標(biāo)記、酶促反應(yīng)放大信號等高科技手段，這些復(fù)合物如同夜空中最亮的星，被一一捕捉并量化分析，從而精準(zhǔn)地揭示出樣本中抗體的存在與否及其濃度水平。
正是憑借這種高度特異性和敏感性的雙重優(yōu)勢，間接法在傳染病診斷領(lǐng)域展現(xiàn)出了無與倫比的魅力與實力。無論是隱匿于血液中的病毒痕跡，還是潛伏于體液深處的細(xì)菌抗體，都難逃其法眼，使得臨床醫(yī)生能夠迅速而準(zhǔn)確地作出診斷，為患者的及時治療與康復(fù)贏得寶貴時間。
競爭法測抗體：當(dāng)抗原材料中的干擾物質(zhì)不易除去，或不易得到足夠的純化抗原時，可用此法檢測特異性抗體。其原理為標(biāo)本中的抗體和一定量的酶標(biāo)抗體競爭與固相抗原結(jié)合?？笻Be的檢測一般采用此法。
競爭法測抗原：小分子抗原或半抗原因缺乏可作夾心法的兩個以上的位點，因此不能用雙抗體夾心法進(jìn)行測定，可以采用競爭法模式。其原理是標(biāo)本中的抗原和一定量的酶標(biāo)抗原競爭與固相抗體結(jié)合。標(biāo)本中抗原量含量愈多，結(jié)合在固相上的酶標(biāo)抗原愈少，后的顯色也愈淺。小分子激素、藥物等ELISA測定多用此法。
原創(chuàng)作者：上海莼試生物技術(shù)有限公司
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