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技術(shù)服務(wù)

蛋白質(zhì)羰基含量測定試劑盒測定原理

閱讀：70     發(fā)布時間：2024/6/24 10:29:57

蛋白質(zhì)羰基含量測定試劑盒測定原理
 
羰基與2,4-二硝基苯肼反應(yīng)生成紅色2,4-二硝基苯腙，在370nm處有特征吸收峰。
 
自備實驗用品及儀器
 
天平、恒溫水浴鍋、低溫離心機、漩渦震蕩儀、可見分光光度計、1 mL玻璃比色皿和蒸餾水，無水乙醇，乙酸乙酯。
 
試劑組成和配制
 
提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存。
 
試劑一：粉劑0.1g×5支，4℃避光保存。（使用前根據(jù)樣品數(shù)，每支加1mL水溶解，每支為10個樣品用量）
 
試劑二：液體20mL×1瓶，4℃避光保存。
 
試劑三：液體20mL×1瓶，4℃保存。
 
試劑四：液體25mL×1瓶，4℃保存。
 
試劑五：根據(jù)測定樣品量，將乙酸乙酯和無水乙醇等體積混合。
 
試劑六：液體100mL×1瓶，4℃保存。
 
樣品處理
 
1.組織樣品：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL提取液）進行冰浴勻漿，于4℃，4000g離心10min，取上清，加入0.1mL試劑一，室溫放置10min，4℃，10000g離心10min，取上清待測。
 
2.細(xì)菌、真菌：按照細(xì)胞數(shù)量（104個）：提取液體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細(xì)胞加入1mL提取液），冰浴超聲波破碎細(xì)胞（功率300w，超聲3秒，間隔7秒，總時間3min）；然后10000g，4℃，離心10min，取上清置于冰上待測。
 
3.血清等液體樣本：直接測定。

原創(chuàng)作者：上海莼試生物技術(shù)有限公司

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