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技術(shù)服務(wù)
BJ5183-AD-1電擊感受態(tài)細胞的操作方法
閱讀:192 發(fā)布時間:2024/6/5 11:49:39
BJ5183-AD-1電擊感受態(tài)細胞的操作方法,是一項精細且嚴謹?shù)纳飳W實驗技術(shù)。在進行此操作前,實驗者需確保所有設(shè)備和試劑均已清潔并消毒,以避免外界微生物的污染。同時,實驗環(huán)境應(yīng)保持潔凈、干燥且溫度適宜,以確保細胞的正常生長和轉(zhuǎn)化效率。
首先,我們需要準備電擊杯。電擊杯作為關(guān)鍵工具,其清潔度和干燥度直接影響到電擊轉(zhuǎn)化的成功率。因此,在每次使用前,我們都應(yīng)對其進行嚴格的清洗和烘干。接著,取出適量的
BJ5183-AD-1電擊感受態(tài)細胞,輕輕懸浮于預冷的電擊緩沖液中。這一步驟要求操作輕柔,避免對細胞造成損傷。
接下來是電擊轉(zhuǎn)化過程。將含有質(zhì);駾NA片段的細胞懸液加入電擊杯中,確保液體均勻分布。然后,將電擊杯放入電擊儀中,根據(jù)預設(shè)的參數(shù)進行電擊。電擊過程中,細胞會短暫地打開細胞膜上的小孔,使得外源DNA得以進入細胞內(nèi)部。
電擊結(jié)束后,立即向電擊杯中加入預熱的復蘇培養(yǎng)基。復蘇培養(yǎng)基的作用是提供適宜的營養(yǎng)環(huán)境,幫助細胞恢復正常生理狀態(tài),并提高轉(zhuǎn)化效率。隨后,將電擊杯中的細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌試管中,置于搖床中恒溫培養(yǎng)一段時間。
最后,通過涂布平板或離心篩選等方法,挑選出成功轉(zhuǎn)化的細胞克隆。這些克隆細胞將攜帶外源DNA,為后續(xù)的實驗研究提供重要的物質(zhì)基礎(chǔ)。
原創(chuàng)作者:上海莼試生物技術(shù)有限公司