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技術(shù)服務(wù)

單寧酶（Tannase，TAN）試劑盒分光光度法注意事項(xiàng)

閱讀：77     發(fā)布時(shí)間：2024/4/7 10:59:52

     單寧酶是一種重要的酶類，在科研實(shí)驗(yàn)中扮演著不可或缺的角色。而在使用單寧酶試劑盒進(jìn)行分光光度法實(shí)驗(yàn)時(shí)，我們需要注意一些關(guān)鍵事項(xiàng)。首先，要確保實(shí)驗(yàn)環(huán)境干凈衛(wèi)生，避免污染和干擾。其次，在準(zhǔn)備試劑和樣品時(shí)，要嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行，避免誤差和偏差。此外，實(shí)驗(yàn)過程中要注意控制溫度和光照條件，以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。
同時(shí)，我們還需要注意實(shí)驗(yàn)器材的清潔和消毒，避免交叉污染。在使用單寧酶試劑盒時(shí)，我們還應(yīng)該了解該酶的特性。單寧酶廣泛存在于微生物和植物中，能夠水解帶有兩個(gè)苯酚基的酸，如鞣酸。它在處理啤酒、制造速溶茶以及去除柿子澀味等方面都有著廣泛的應(yīng)用。
注意：
 
可以在不同對(duì)照管中加入不同樣品的粗酶液，然后集中進(jìn)行5min 95℃沸水浴處理。
 
TAN活力單位的計(jì)算
 
標(biāo)準(zhǔn)條件下測(cè)定回歸方程為y = 0.0058x + 0.0044，R2 = 0.9994；x為PG含量（μmol/L），y為吸光值。
 
1、按樣本體積計(jì)算
 
單位的定義：40℃下每毫升粗酶液每分鐘水解減少0.01μmol底物PG所需要的酶量定義為一個(gè)酶活單位。
 
TAN活性(μmol/min/mL)=(ΔA-0.0044）÷0.0058÷1000×V反總÷0.01÷V樣÷T
 
=34.48×( ΔA-0.0044）
 
2、按照蛋白濃度計(jì)算
 
單位的定義：40℃下每毫克蛋白每分鐘水解減少0.01μmol底物PG所需要的酶量定義為一個(gè)酶活單位(U)。
 
TAN活性((μmol/min/mg prot)=(ΔA-0.0044）÷0.0058÷1000×V反總÷0.01÷(V樣×Cpr)÷T
 
=34.48×(ΔA-0.0044）÷Cpr
 
3、按照樣本鮮重計(jì)算
 
單位的定義：40℃下每克樣品每分鐘水解減少0.01μmol底物PG所需要的酶量定義為一個(gè)酶活單位(U)。
 
TAN活性(μmol/min/g 鮮重)=(ΔA-0.0044）÷0.0058÷1000×V反總÷0.01÷(V樣÷V樣總×W)÷T
 
=34.48×(ΔA-0.0044）÷W
 
V反總：反應(yīng)體系總體積，1mL； V樣：加入樣本體積，0.05mL；V樣總：加入提取液體積，1 mL；T：反應(yīng)時(shí)間，10min；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g。
   單寧酶試劑盒的分光光度法實(shí)驗(yàn)需要我們精心準(zhǔn)備和操作，確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。讓我們一起探索單寧酶的奧秘，為科研事業(yè)貢獻(xiàn)力量！

原創(chuàng)作者：上海莼試生物技術(shù)有限公司

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