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斑馬魚鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶（CaN）ELISA試劑盒間接法（檢測未知抗體）

閱讀：290     發(fā)布時(shí)間：2023/10/10 10:40:27

斑馬魚鈣調(diào)神經(jīng)磷酸酶(CaN)ELISA試劑盒間接法(檢測未知抗體)
1、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1-10ug/ml， 每孔加0.1ml，4℃過夜。次日洗滌3次。
2、加樣：加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí),洗滌。(同時(shí)做空白、陰性及陽性孔對照)
3、加酶標(biāo)抗體：于反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.05ml，37℃孵育30-60分鐘，洗滌,最后一遍用DDW洗滌。
4、加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鐘。
5、終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽性程度越強(qiáng)，陰性反應(yīng)為無色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號(hào)表示。也可測OD值：在ELISA檢測儀上，于450nm(若以ABTS顯色，則410nm)處，以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值，若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍，即為陽性。
LISA試劑盒的儲(chǔ)存及有效期         
 
1. 未開封的試劑盒：所有試劑均按試劑瓶標(biāo)簽上所示保存。請注意，收到試劑盒后請盡快將TMB 洗滌液，終止液保存于4℃，其他試劑保存于-20℃。
 
2. 使用后的試劑盒：剩余試劑仍需按照試劑瓶標(biāo)簽所示的溫度保存，開封后的酶標(biāo)板要加干燥劑后密封保存于-20℃，避免潮濕。
 
注意：
 
試劑盒內(nèi)酶標(biāo)條可拆卸，按實(shí)驗(yàn)需求可分多次使用；使用后的剩余試劑盒建議在首次實(shí)驗(yàn)后1個(gè)月內(nèi)使用完畢。產(chǎn)品過期時(shí)間以盒子上的標(biāo)簽為準(zhǔn)，保質(zhì)期內(nèi)所有組分都確保是穩(wěn)定的。
 
 ELISA試劑盒報(bào)告內(nèi)容及標(biāo)準(zhǔn)         
 
1、ELISA標(biāo)準(zhǔn)曲線；
 
2、詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)步驟；
 
3、完整的實(shí)驗(yàn)報(bào)告（試劑耗材，實(shí)驗(yàn)方法，實(shí)驗(yàn)結(jié)果及結(jié)果說明）

原創(chuàng)作者：上海莼試生物技術(shù)有限公司

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