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奧葉茲基氏病病毒探針法熒光PCR檢測試劑盒反應(yīng)五要素

閱讀：448     發(fā)布時(shí)間：2022/9/27 16:30:13

奧葉茲基氏病病毒探針法熒光PCR檢測試劑盒反應(yīng)五要素：

參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：

①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。

②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。

③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。

⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)第二個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。

⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。

⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。

奧葉茲基氏病病毒探針法熒光PCR檢測試劑盒引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。
脊髓小腦共濟(jì)失調(diào)10抗體
蛋白激酶A錨定蛋白7抗體
腺苷三磷酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體12抗體
腺苷三磷酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體9抗體
三磷酸腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4抗體
肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白LIM3抗體
高爾基復(fù)合體相關(guān)蛋白1抗體
乙酰輔酶A羧化酶1ACCα抗體
腺嘌呤核苷酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1、2、3、4抗體
去整合素樣金屬蛋白酶12
磷酸化乙酰輔酶A羧化酶1ACCα抗體
膜粘連蛋白2受體抗體
晚期糖基化終末產(chǎn)物特異性受體抗體
ADCK5蛋白抗體
艾滋病病毒復(fù)制結(jié)合蛋白抗體
AFP4b蛋白抗體
HIV-1病毒復(fù)制結(jié)合蛋白2抗體
伴侶蛋白bc1同源復(fù)合體抗體
心肌錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域1抗體
抑制蛋白結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體
抑制蛋白結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體
抑制蛋白結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體
抑制蛋白結(jié)構(gòu)域蛋白4抗體
雌二醇抗體
淀粉樣蛋白β前體樣蛋白2抗體
淀粉樣蛋白β前體樣蛋白1抗體
轉(zhuǎn)錄激活蛋白crsp70抗體
 

原創(chuàng)作者：上海莼試生物技術(shù)有限公司

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