(1)實(shí)驗(yàn)開始前將RNA提取液于65℃水浴鍋中預(yù)熱,離心管中加入ME(巰基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取約0.8g菌絲體(液體培養(yǎng)獲得的菌絲用真空抽濾即可!固體培養(yǎng)就更好說了),在液氮中迅速磨成精細(xì)粉末,裝入50mL離心管,按1g材料8mL的量加入預(yù)熱的RNA提取液,顛倒混勻
(3)65℃水浴3-10 min,期間混勻2-3次
(4)加入等體積的酚(注意是酸酚pH4.5)::異戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等體積的:異戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V體積10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或過夜)
(7)10,000rpm,4℃離心20min
(8)棄上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::異戊醇(25:24:1)抽提兩次,:異戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V體積的無水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃離心20 min
(12)棄上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC處理水溶解
(14)用非變性瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計(jì)掃描檢測RNA的質(zhì)量(在抽提過程中,若蛋白質(zhì)含量或其它的雜質(zhì)還較多,可以增加抽提次數(shù))抑制素A(INH-A)ELISA試劑盒
抑制素(INH)ELISA試劑盒
抑肽酶(AP)ELISA試劑盒
抑瘤素M(OSM)ELISA試劑盒
異質(zhì)性胞核核糖核蛋白R(hnRNP R)ELISA試劑盒
異質(zhì)性胞核核糖核蛋白P2(hnRNP P2)ELISA試劑盒
異質(zhì)性胞核核糖核蛋白M(hnRNP M)ELISA試劑盒
異質(zhì)性胞核核糖核蛋白L(hnRNP L)ELISA試劑盒
異質(zhì)性胞核核糖核蛋白K(hnRNP K)ELISA試劑盒
異質(zhì)性胞核核糖核蛋白I(hnRNP I/PTB)ELISA試劑盒
異質(zhì)性胞核核糖核蛋白H(hnRNP H)ELISA試劑盒
異質(zhì)性胞核核糖核蛋白G(hnRNP G)ELISA試劑盒
異質(zhì)性胞核核糖核蛋白E(hnRNP E)ELISA試劑盒
異質(zhì)性胞核核糖核蛋白D(hnRNP D)ELISA試劑盒
異質(zhì)性胞核核糖核蛋白C(hnRNP C)ELISA試劑盒
異質(zhì)性胞核核糖核蛋白A3(hnRNP A3)ELISA試劑盒
異質(zhì)性胞核核糖核蛋白A2/B1(hnRNP A2/B1)ELISA試劑盒
異質(zhì)性胞核核糖核蛋白A1(hnRNP A1)ELISA試劑盒
異質(zhì)性胞核核糖核蛋白A0(hnRNP A0)ELISA試劑盒
異質(zhì)型核糖核蛋白復(fù)合物/抗RA33抗體(hnRNP/RA33)ELISA試劑盒
異質(zhì)核糖核蛋白Q(SYNCRIP/HNRPQ/NSAP1)ELISA試劑盒
異鎖鏈素(IDES)ELISA試劑盒
異檸檬酸脫氫酶(ICD)ELISA試劑盒
原創(chuàng)作者:上海莼試生物技術(shù)有限公司