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技術(shù)服務(wù)

檸檬酸合酶（CS）樣本的前處理

閱讀：531     發(fā)布時(shí)間：2021/8/26 15:41:11

檸檬酸合酶(CS）樣本的前處理：
組織、細(xì)菌或細(xì)胞中胞漿蛋白與線粒體蛋白的分離：
1、 稱取約 0.1g 組織或收集 500 萬(wàn)細(xì)胞，加入 1mL 試劑一和 10uL 試劑三，用冰浴勻漿器
或研缽勻漿。
2、 將勻漿 600g，4℃離心 5min。
3、 棄沉淀，將上清液移至另一離心管中，11000g，4℃離心 10min。
4、 上清液即胞漿提取物，可用于測(cè)定從線粒體泄漏的 α-KGDH（此步可選做）。
5、 在步驟④的沉淀中加入 200uL 試劑二和 2uL 試劑三，超聲波破碎（冰浴，功率 20％或
200W，超聲 3 秒，間隔 10 秒，重復(fù) 30 次），用于線粒體 α-KGDH 活性測(cè)定。
檸檬酸合酶(CS）測(cè)定步驟
1、 分光光度計(jì)或酶標(biāo)儀預(yù)熱 30min 以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至 340nm，蒸餾水調(diào)零。
2、 樣本測(cè)定
（1）在試劑五中加入 18mL 試劑四充分溶解，置于 37℃（哺乳動(dòng)物）或 25℃（其它物種）
水浴 10min；現(xiàn)配現(xiàn)用；
（2）在試劑六中加入 1mL 蒸餾水，充分溶解待用；現(xiàn)配現(xiàn)用；
（3）在微量石英比色皿或 96 孔板中加入 10μL 樣本、10μL 試劑六和 180μL 試劑五，混
勻，立即記錄 340nm 處 20s 時(shí)的吸光值 A1 和 2min20s 后的吸光值 A2，計(jì)算 ΔA=A2-A1。
大鼠蛋白激酶G(PKG)ELISA Kit
大鼠蛋白激酶C epsilon(PKCε)ELISA Kit
大鼠彈性蛋白(ELN)ELISA Kit
大鼠彈力蛋白酶ELISA Kit
大鼠膽堿乙酰轉(zhuǎn)移酶(ChAT)ELISA Kit
大鼠膽固醇24S-羥化酶(CYP46)ELISA Kit
大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白4(MCP-4)ELISA Kit
大鼠單銨氧化酶(MAO)ELISA Kit
大鼠大內(nèi)皮素1ELISA Kit
大鼠催產(chǎn)素(OT)ELISA Kit
大鼠促胰液素/胰泌素(Sct)ELISA Kit
大鼠促性腺激素抑制激素(GnIH)ELISA Kit
檸檬酸合酶(CS）
大鼠促酰化蛋白(ASP)ELISA Kit
大鼠促腎上腺皮質(zhì)激素釋放因子(CRF)ELISA Kit
大鼠促甲狀腺素受體(TSHR)ELISA Kit
大鼠促甲狀腺素(TSH)ELISA Kit
大鼠雌酮(E1)ELISA Kit
大鼠雌激素硫酸轉(zhuǎn)移酶(SULT1E1)ELISA Kit
大鼠雌二醇(E2)抗體ELISA Kit
大鼠垂草扁桃酸(VMA)ELISA Kit
大鼠穿孔素/成孔蛋白(PF/PFP)ELISA Kit
大鼠成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子9(FGF9)ELISA Kit
大鼠成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子8(FGF8)ELISA Kit
大鼠成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子23(FGF-23)ELISA Kit
 
 

原創(chuàng)作者：上海莼試生物技術(shù)有限公司

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