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包納米蟲（Bona）核酸檢測(cè)試劑盒（PCR-熒光探針法）包括以下步驟

閱讀：430     發(fā)布時(shí)間：2021/8/19 10:38:17

包納米蟲（Bona）核酸檢測(cè)試劑盒（PCR-熒光探針法）的步驟：
 
(1)將包納米蟲（Bona）核酸檢測(cè)試劑盒（PCR-熒光探針法）參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線；
 
(2)待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
 
其中步驟(1)為：將參照基因與待測(cè)目的基因片段等比例連接，克隆到同一個(gè)質(zhì)粒載體上，構(gòu)建一種可同時(shí)用于參照基因以及待測(cè)目的基因擴(kuò)增檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品，并將所得標(biāo)準(zhǔn)品按照濃度梯度稀釋后同時(shí)用于繪制參照基因以及待測(cè)目的基因的標(biāo)準(zhǔn)曲線。
 
其中所述參照基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)參照基因，較佳地管家基因，優(yōu)選地為RPPH1的擴(kuò)增區(qū)域，其中所述質(zhì)粒載體為本領(lǐng)域常規(guī)質(zhì)粒載體，較佳地為PCR克隆載體，優(yōu)選地為TA cloning載體，所述TA cloning載體較佳地為pMD18-T載體。其中所述標(biāo)準(zhǔn)品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例較佳地為1：1。由于標(biāo)準(zhǔn)品中待測(cè)目的基因與參照基因的比例為1:1，解決了目前相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線法應(yīng)用中目的基因與參照基因的濃度比例關(guān)系難以控制的問題，提高HER2基因擴(kuò)增檢測(cè)的可靠性。
 
步驟(2)為：待測(cè)樣本與步驟(1)所述標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)同步進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR擴(kuò)增后，目的基因與參照基因按照各自的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算各自的拷貝數(shù)，計(jì)算待測(cè)樣本的目的基因與參照基因拷貝數(shù)比值，即得目的基因的拷貝數(shù)相對(duì)定量檢測(cè)結(jié)果。
 
其中所述待測(cè)目的基因?yàn)楸绢I(lǐng)域常規(guī)待測(cè)目的基因，較佳地為腫瘤或者疾病的特異性基因，更佳地為HER2基因的擴(kuò)增區(qū)域，所述熒光定量PCR擴(kuò)增為本領(lǐng)域常規(guī)熒光定量PCR擴(kuò)增方法，所述熒光定量PCR擴(kuò)增方法較佳地為多通道熒光定量PCR擴(kuò)增，更佳地為雙通道熒光定量PCR擴(kuò)增。
髓鞘相關(guān)糖蛋白(MAG)ELISA試劑盒
髓鞘堿性蛋白抗體(MBP)ELISA試劑盒
髓鞘堿性蛋白抗體(MBP antibody)ELISA試劑盒
髓鞘蛋白P0(MPZ)ELISA試劑盒
髓磷脂堿性蛋白(MBP)ELISA試劑盒
髓磷脂P2蛋白(PMP2)ELISA試劑盒
髓過氧化物酶特異性抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體IgG(MPO-ANCA IgG)ELISA試劑盒
髓過氧化物酶(MPO)ELISA試劑盒
酸性鐵蛋白(AIF)ELISA試劑盒
酸性神經(jīng)鞘磷脂酶(ASM)ELISA試劑盒
酸性磷酸酶(ACP)ELISA試劑盒
酸性富亮氨酸核磷蛋白32家族成員E(ANP32E)ELISA試劑盒
酸性成纖維細(xì)胞生長因子1(aFGF-1)ELISA試劑盒
酸性成纖維細(xì)胞生長因子(aFGF/FGF-1)ELISA試劑盒
酸性成纖維細(xì)胞生長因子(aFGF)ELISA試劑盒
松弛肽/松弛素(RLN)ELISA試劑盒
松弛素(RLN)ELISA試劑盒
四氫生物蝶呤(BH4)ELISA試劑盒
四連接素(CLEC3B)ELISA試劑盒
死亡相關(guān)蛋白1(DAP/DAP1)ELISA試劑盒
 

原創(chuàng)作者：上海莼試生物技術(shù)有限公司

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