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小鼠骨髓瘤細胞；P3/NSI/1-Ag4-1細胞株培養(yǎng)的無菌技術(shù)要點

閱讀：467     發(fā)布時間：2021/6/23 16:40:21

小鼠骨髓瘤細胞；P3/NSI/1-Ag4-1細胞株培養(yǎng)的具體無菌技術(shù)要點：
1. 實驗開始前，無菌室和無菌操作臺需要紫外光照射30到60分鐘完全滅菌，用70%ethanol擦拭無菌操作臺面，并且打開無菌操作臺風(fēng)扇運行10分鐘之后，才可以進行實驗操作。每次操作只能處理一株細胞株，即使培養(yǎng)基完全相同也不可共用培養(yǎng)基，以避免細胞間污染或失誤混淆。實驗完成后，請將實驗物品拿出工作臺，用70%ethanol再次擦拭無菌操作臺面。操作間隔應(yīng)該讓無菌操作臺運轉(zhuǎn)10分鐘到15分鐘后，才能進行下一個細胞株的操作。
2. 無菌操作工作的區(qū)域應(yīng)保持清潔和寬敞，必要物品（試管架、吸管、吸取器或吸管盒等）可以暫時放置，其它實驗用品使用完畢后應(yīng)移出，有利于空氣流通。實驗用品需70%ethanol擦拭后方可帶入無菌操作臺內(nèi)。實驗操作過程應(yīng)在臺面的中央無菌區(qū)域內(nèi)完成，請勿在邊緣非無菌區(qū)域進行操作。
3. 小心取用無菌實驗物品，避免細菌污染。請勿觸碰吸管尖頭部和容器瓶口處，也不要在打開的容器正上方進行操作。容器打開后，請用手夾住瓶蓋并輕握瓶身，傾斜大約45°角取用，盡量不要將瓶蓋口朝上放置于桌面。
4. 工作人員應(yīng)當(dāng)首先注意自身安全，必須穿戴齊實驗衣和實驗手套后才能進行實驗。對于病毒感染或是來自人類的細胞株應(yīng)當(dāng)特別小心操作，并選擇適當(dāng)?shù)燃壍臒o菌操作臺進行（至少是Class II）。操作過程中，應(yīng)避免引起aerosol的產(chǎn)生，小心有毒性藥品，例如DMSO和TPA等，并避免針頭的傷害等等。
5. 定期檢測下列項目：
5.1. CO2鋼瓶的CO2壓力
5.2. CO2培養(yǎng)箱的CO2濃度、溫度、和水盤是否有污染（水盤的水需用無菌水，每周定時更換）。
5.3. 無菌操作臺內(nèi)的airflow壓力，定期更換紫外線燈管和HEPA過濾膜，預(yù)濾網(wǎng)（300小時/預(yù)濾網(wǎng)，3000小時/HEPA）。
6. 水槽內(nèi)可添加消毒劑（Zephrin 1:750），需定期更換水槽中的水。
人小腸粘膜上皮細胞完全培養(yǎng)基
人結(jié)腸粘膜上皮細胞完全培養(yǎng)基
人直腸粘膜上皮細胞完全培養(yǎng)基
人肝內(nèi)膽管上皮細胞完全培養(yǎng)基
人肝實質(zhì)細胞完全培養(yǎng)基
人肝動脈內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基
人肝動脈平滑肌細胞完全培養(yǎng)基
人肝星形細胞完全培養(yǎng)基
人肝竇內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基
人胃粘膜上皮細胞完全培養(yǎng)基
人直腸平滑肌細胞完全培養(yǎng)基
人胎盤羊膜細胞完全培養(yǎng)基
人胎盤滋養(yǎng)層細胞完全培養(yǎng)基
人胎盤絨毛膜細胞完全培養(yǎng)基
人子宮平滑肌細胞完全培養(yǎng)基
人子宮成纖維細胞完全培養(yǎng)基
人卵巢上皮細胞完全培養(yǎng)基
人卵巢成纖維細胞完全培養(yǎng)基
人卵巢微血管內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基
人子宮內(nèi)膜上皮細胞完全培養(yǎng)基
人子宮頸上皮細胞完全培養(yǎng)基
人睪丸支持細胞完全培養(yǎng)基
人腎小球內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基
人腎管狀上皮細胞完全培養(yǎng)基
人腎皮層上皮細胞完全培養(yǎng)基
人腎上皮細胞完全培養(yǎng)基
人輸尿管上皮細胞完全培養(yǎng)基
人腎實質(zhì)細胞完全培養(yǎng)基
 

原創(chuàng)作者：上海莼試生物技術(shù)有限公司

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