人細(xì)小病毒（B19）核酸檢測試劑盒操作流程

閱讀：1258     發(fā)布時間：2021/1/14 14:41:45

人細(xì)小病毒（B19）核酸檢測試劑盒操作流程：

1.動/植物源性成分核酸檢測試劑盒（PCR-熒光探針法） 根據(jù)要保存的各樣本的體積，計算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量應(yīng)當(dāng)是組織體積的10倍（如100mg組織約用1ml RNAwait）；離心收集2×106細(xì)胞RNAwait的用量是1ml。

2. 將RNAwait按需要量分裝入自備保存管中；

3. 快速將較大的組織切成厚度<0.5 cm的任意片狀，立即完全浸入RNAwait中。組織的厚度一定要<0.5 cm。組織過厚則RNAwait不能有效滲入，組織中間部位的RNA不能受到保護。較小的組織（如大鼠的腎臟、脾臟，小鼠的大部分器官）取下后可以直接浸入RNAwait。

4. 保存時先將樣本浸入RNAwait后置4℃冰箱過夜（4℃過夜是必需的，這樣可使RNAwait完全滲入到組織中），然后轉(zhuǎn)移到-20℃冰箱（RNAwait在-20℃時仍為液態(tài)，有結(jié)晶析出，是正常情況）；或者在4℃冰箱過夜后，從RNAwait中取出組織塊，轉(zhuǎn)移到-80℃冰箱。在RNAwait中保存的標(biāo)本，反復(fù)凍融至室溫20次不影響RNA的質(zhì)量。

人細(xì)小病毒（B19）核酸檢測試劑盒組成及試劑配制:

1、 人細(xì)小病毒(B19)核酸檢測試劑盒方法酶標(biāo)板：一塊（96孔）

2、 標(biāo)準(zhǔn)品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。

3、 樣品稀釋液：1×20ml。

4、 檢測稀釋液A：1×10ml。

5、 檢測稀釋液B：1×10ml。

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原創(chuàng)作者：上海莼試生物技術(shù)有限公司