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技術服務

Ⅱ型肺泡細胞表面抗原ELISA試劑盒的間接法

閱讀：446     發(fā)布時間：2021/1/6 14:23:33

Ⅱ型肺泡細胞表面抗原ELISA試劑盒的間接法:
1.用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1～10μg／ml，每孔加0.1ml，4℃過夜。
 
2.次日洗滌3次。
 
3.加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時,洗滌。(同時做空白、陰性及陽性孔對照)于反應孔中，加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.1ml，37℃孵育30-60分鐘，洗滌,最后一遍用DDW洗滌。
 
4. 加底物液顯色：于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃10～30分鐘。
 
5. 終止反應：于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。
 
6. 結果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結果：反應孔內(nèi)顏色越深，陽性程度越強，陰性反應為無色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號表示。也可測O·D值：在ELISA檢測儀上，于450nm(若以ABTS顯色，則410nm)處，以空白對照孔調(diào)零后測各孔O·D值，若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍，即為陽性。
1.  加樣：每孔各加入標準品或待測樣品 100ul ，將反應板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2.  洗板：用洗滌液將反應板充分洗滌 4-6 次，向濾紙上印干。
3.  每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4.  洗板：同前。
5.  每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
6.  洗板：同前。
7.  每孔加入底物工作液100ul ，置 37   ℃ 暗處反應15 分鐘。
8.  每孔加入100ul 終止液混勻。
9.  30分鐘內(nèi)用酶標儀在 45 0 nm 處測 吸光值。
人腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體3(TRAIL-R3)elisa試劑盒
人腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體1(TRAIL-R1)elisa試劑盒
人腫瘤壞死因子β(TNF-β)elisa試劑盒
人腫瘤壞死因子α(TNF-α)elisa試劑盒 
人腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)elisa試劑盒
人腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)elisa試劑盒
Ⅱ型肺泡細胞表面抗原ELISA試劑盒
人轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)elisa試劑盒
人轉(zhuǎn)化生長因子α(TGF-α)elisa試劑盒
人基質(zhì)細胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)elisa試劑盒 
人干細胞因子受體(SCFR)elisa試劑盒
人干細胞因子/肥大細胞生長因子(SCF/MGF)elisa試劑盒
人可溶性CD40配體(sCD40L)elisa試劑盒 
人可溶性CD30配體(sCD30L)elisa試劑盒 
人正常T細胞表達和分泌因子(RANTES/CCL5)elisa試劑盒 
人P選擇素(P-Selectin/CD62P/GMP140)elisa試劑盒
人血血小板衍生生長因子AB(PDGF-AB)elisa試劑盒
人血血小板衍生生長因子可溶性受體α(PDGFsR-α)elisa試劑盒
人神經(jīng)營養(yǎng)因子4(NT-4)elisa試劑盒
 

原創(chuàng)作者：上海莼試生物技術有限公司

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